عمون- يعتبر التعقيم في مختبرات زراعة الأنسجة النباتية أمرًا حاسمًا قبل بدء العملية، وذلك لضمان نجاح التجربة. يتم زراعة الأنسجة داخل مختبرات ومعامل معقمة لضمان نجاح زراعة الأنسجة النباتية. تُعتبر التلوث أثناء عملية الزراعة سببًا رئيسيًا لفشل الزراعة، حيث يمكن أن تتواجد مسببات التلوث في الأكواب والماصات ووعاء الزراعة. هناك العديد من الأساليب والطرق المختلفة للتعقيم، ومن بينها:

التعقيم بالحرارة:

التعقيم الحراري الرطب: يتم استخدام البخار الساخن عالي الضغط لتعقيم الأدوات المختبرية والمواد الزجاجية والماصات والوسائط المزروعة باستخدام أوتوكلاف. يتم التخلص من معظم الميكروبات بهذه الطريقة.
التعقيم الحراري الجاف: يتم استخدام الحرارة الجافة لتعقيم الأدوات المعدنية مثل الحاملات والملقط عن طريق استخدام معقمات الخرز الزجاجي وموقد البنزن.
التعقيم بالترشيح: يتم استخدام الترشيح لتعقيم المكونات التي لا تحتمل درجات الحرارة العالية، مثل المستخلصات النباتية والهرمونات. يتم استخدام إبرة وغشاء مرشح لتصفية المكونات الحرارية قبل إضافتها إلى وسط الزراعة.

تعقيم الهواء: يتم استخدام معدات معالجة الهواء مثل خزانات التدفق الرقائقي لتعقيم الهواء الذي يحتوي على العديد من الميكروبات. يتم تنقية الهواء من الفطريات والبكتيريا والجزيئات الأخرى.

التعقيم المجزأ أو التندلة: يتم استخدام هذه الطريقة لقتل الأبواغ المقاومة للحرارة، حيث يتم تسخين الوسط في حمام مائي لمدة ساعة واحدة لمدة 3 أيام متتالية، ومن ثم يتم الاحتفاظ به في درجة حرارة الغرفة.

تعقيم السطح: تُستخدم هذه التقنية لتعقيم سطح النبات المستأصل المستخدم في عمليات زراعة الأنسجة.

بالإضافة إلى ذلك، يمكن تعزيز إجراءات التعقيم عن طريق وضع المواد في محلول كحول إيثيلي 70% قبل التعقيم، وإضافة عوامل ترطيب مثل TWEEN 20 أو 80 إلى مواد التعقيم للحد من التوتر السطحي. كما يُفضل تنفيذ عمليات التعقيم تحت التفريغ للتخلص من فقاعات الهواء وتحسين كفاءة التعقيم.